納米光技術(shù)
在新加坡啟奧生物醫(yī)藥園,Chi Ching Goh博士給一只麻醉小鼠注入一個亮黃色溶液,然后在顯微鏡下觀察動物耳朵,打開紫外線開關(guān)后,顯微鏡視野中皮下血管內(nèi)血液發(fā)出綠色熒光,說明這個溶液可以作為一種活體成像顯色劑。Goh是新加坡國立大學(xué)的博士研究生,她希望用這個方法作為炎癥時血管通透性增加的標(biāo)志物,用于診斷瘧疾或預(yù)測中風(fēng)發(fā)生。
這個方法中注射試劑是用發(fā)光病毒顆粒,這種顆粒直徑大小只有幾十納米,這就是所謂“納米光技術(shù)”,科學(xué)家利用這個技術(shù)可以靈活調(diào)整光學(xué)性質(zhì),這種顆粒可以吸收特定波長光線,然后可發(fā)生另外一個波長光線。許多天然化合物如水母蛋白質(zhì)和某些稀土化合物也具有這種特征。但納米光更穩(wěn)定,有更多特性,也更方便制備,使這種材料在工業(yè)和學(xué)術(shù)界受到廣泛重視。
納米光線也屬于量子點范疇,量子點(Quantum Dot)是在把導(dǎo)帶電子、價帶空穴及激子在三個空間方向上束縛住的半導(dǎo)體納米結(jié)構(gòu)。量子點,電子運動在三維空間都受到了限制,因此有時被稱為“人造原子”、“超原子”或“量子點原子”,是20世紀(jì)90年代提出來的一個概念。有些納米光顆粒具有大量吸收低能光子,然后產(chǎn)生少數(shù)高能光子的性能,這樣可以具有釋放多種顏色光線的特征。也可以用聚合物或有機小分子制造,這樣可以比量子點毒性低。過去科學(xué)家一般習(xí)慣于用紫外線和碳基化合物進行這種研究。
Goh使用的這種新材料是新加坡國立大學(xué)的化學(xué)工程師Bin Liu設(shè)計的,難得的是,這種方案可以讓有機粒子比無機粒子發(fā)射的光線都強。
這種材料目前已經(jīng)開始有了應(yīng)用,從新一代電視顯示器到生物化學(xué)分析,科學(xué)家正在對這種材料用于太陽能、DNA序列分析、運動感知和外科手術(shù)等領(lǐng)域。研究熒光納米顆粒的華盛頓大學(xué)教授Daniel Chiu說,這一領(lǐng)域發(fā)展十分迅速。發(fā)明第一個量子點的加州大學(xué)化學(xué)家Paul Alivisatos說,這個領(lǐng)域的應(yīng)用潛力巨大,而且十分好玩。
現(xiàn)代量子點技術(shù)要追溯到上世紀(jì)70年代中期,它是為了解決全球能源危機而發(fā)展起來的。通過光電化學(xué)研究,開發(fā)出半導(dǎo)體與液體之間的結(jié)合面,以利用納米晶體顆粒優(yōu)良的體表面積比來產(chǎn)生能量。初期研究始于上世體80年代早期2個實驗室的科學(xué)家,貝爾實驗室的Louis Brus博士和前蘇聯(lián)Yoffe研究所的Alexander Efros和Victor.I.Klimov博士。Brus博士與同事發(fā)現(xiàn)不同大小的硫化鎘顆粒可產(chǎn)生不同的顏色。這個工作對了解量子限域效應(yīng)很有幫助,該效應(yīng)解釋了量子點大小和顏色之間的相互關(guān)系,也同時也為量子點的應(yīng)用鋪平了道路。
新加坡國立大學(xué)Yin Thai Chan說,量子點漂亮的色彩吸引了大量關(guān)注,但是在應(yīng)用方面并不理想。2000年代早期,這種純粹的色彩吸引了許多電視制造商和生物醫(yī)學(xué)研究者。生物醫(yī)學(xué)主要是希望將這種材料用于蛋白質(zhì)和DNA片段的示蹤標(biāo)記。Liu說,量子點有百般優(yōu)點,但有一個明顯的缺點,就是毒性比較大。最常見的量子點材料含鎘,有很強的生物毒性。這大大限制了量子點的生物醫(yī)學(xué)應(yīng)用,一些國家嚴(yán)格限制在家用電器中使用含鎘材料。解決問題的辦法是用鋅和銦代替鎘,后者的毒性相對小一些?;蛘哂蒙锵嗳菪缘亩嗑畚飳⒑k材料進行包裹起來。但是毒性仍然讓科學(xué)家在生物醫(yī)學(xué)上的應(yīng)用倍加小心,如在腫瘤周圍進行熒光標(biāo)記識別腫瘤細胞的外科手術(shù)方法。
量子點的這些局限迫使科學(xué)家從自然材料中尋找納米顆粒。量子點等發(fā)光性質(zhì)決定于材料組成,而非顆粒大小和形狀。這給科學(xué)家降低了制造特定顏色材料的難度,因為不需要將所有材料制造程同樣尺寸,也就是只需要在材料成分上下功夫。在備用材料方面,如從1950年代開始就開始研究的半導(dǎo)體多聚物。這種鏈?zhǔn)浇Y(jié)構(gòu)是簡單成分組成,電子可以在其中自由移動,但是材料的成分決定只允許某種能量的電子自由移動。當(dāng)外部能量如紫外線進入這種材料可以將電子釋放出來,這導(dǎo)致材料的能級下降。這種多聚物可以進行修飾,以獲得更多特性。例如可以靶向癌癥細胞和增加水溶性。當(dāng)這種聚合物被組裝成為納米顆粒或P點,其光亮度可以達到同樣大小量子點的30倍。
用于量子點的半導(dǎo)體聚合物不如無機半導(dǎo)體穩(wěn)定,但因為這種材料骨架為碳,沒有任何金屬成分,生物兼容性比較好。P點已經(jīng)用于細胞成像,也用于氧氣、蛋白酶活性或銅離子的分析。2013年,Chiu等報道P點結(jié)合鋱離子可以探測細菌孢子釋放的生物分子。在紫外燈照射下,P點發(fā)暗藍色光,而鋱離子發(fā)微弱綠熒光。當(dāng)這種材料與生物分子結(jié)合后,鋱離子發(fā)光增強為亮綠色,而P點發(fā)光特征沒有變化,后者可以作為內(nèi)參標(biāo)準(zhǔn)。不幸的是,P-dots也有一個缺點,密切擁擠在一起的聚合物分子會發(fā)生淬滅現(xiàn)象,這種現(xiàn)象導(dǎo)致大部分外來能量迅速消散,無法長時間持續(xù)激發(fā)熒光。
臺灣中山大學(xué)化學(xué)家Yang-Hsiang Chan說,淬滅是工作效率的重要影響因素,一個方案是加入一些聚合物骨架避免這些聚合物過于緊湊。但是這會導(dǎo)致顆粒體積增多,增加擴散進入細胞的難度。如何把握平衡是這種工作的關(guān)鍵技術(shù)。
關(guān)鍵解決方案的線索最早是2001年被香港科技大學(xué)Ben Zhong Tang發(fā)現(xiàn)的,他們課題組發(fā)現(xiàn)一類有機物分子只有聚集在一起時可以發(fā)出熒光,這些分子的形狀類似螺旋槳和紙風(fēng)車,當(dāng)聚合在一起時由于運動受到限制,能量損耗減少,用發(fā)光作為釋放能量的方式。Tang已經(jīng)給這種材料命名為聚合誘導(dǎo)激發(fā)aggregation-inducedemission (AIE),這種分子被稱為AIE基AIE-gens。隨后幾年,Tang和學(xué)生們改變這些分子基團,增加一些元素如氧和氮,AIE-gens能發(fā)射從紫外線到近紅外全部波長的光線?,F(xiàn)在已經(jīng)實現(xiàn)任意調(diào)整光線,隨時大量制備的技術(shù)。
2011年,在新加坡材料與工程研究院政府合作項目中,Tang遇到Liu。Tang的AIE-gens那時除了沒有水溶性外,已經(jīng)制作非常完善,不溶解水是限制生物應(yīng)用的障礙。Liu恰好是這方面的專家,于是兩人開始合作。通過將聚合物進行水溶和脂溶雙頭修飾,Liu解決了這種材料無法水溶解的問題。AIE-gens材料的脂溶端朝內(nèi)聚合在一起,水溶端朝外形成一個保護性外殼,形成一個能溶解于水的內(nèi)部充滿AIE-gens材料的微小膠囊。
這次材料被稱為AIE點,這種材料也可以進行各種化學(xué)修飾,用于不同的目的。這種外殼能包裹各種類型的AIE-gens,這給篩選最佳分子提供了高效率。
AIE點已經(jīng)被用于各種組織染色,從腫瘤血管到亞細胞結(jié)構(gòu)。2015年,liu和Tang等報道了AIE用于光敏納米材料療法,這種材料攜帶兩個分子,一個攜帶AIE點進入腫瘤細胞,另一個協(xié)助與線粒體結(jié)合。用外來光源照射后,AIE點在線粒體附近產(chǎn)生紅色光制造氧自由基,將癌細胞破壞殺死。最好的AIE點亮度可以超過量子點40倍,Liu實驗室的研究助理Guangxue Feng說,利用這種AIE點材料可在狹小空間內(nèi)制造強光。這非常適合于組織顯微成像和長期示蹤的研究,理論上每次細胞分裂,這種材料濃度會下降一半。但是亮度增加也是有代價的,AIE點可以制造出大范圍波長和更多色彩,但是光線的純度和色彩的鮮艷度不如量子點。
Liu已經(jīng)在新加坡創(chuàng)辦了一家公司LuminiCell專門生產(chǎn)三種色彩和三種大小的AIE點材料。Tang也準(zhǔn)備開一家公司,兩人都希望能獲得美國FDA授權(quán),將這種材料用于人類外科手術(shù)精確切除的輔助分辨。